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Article高壓蒸汽滅菌器操作步驟及注意事項
更新時(shí)間:2019-03-04 點(diǎn)擊次數:1515次
高壓蒸汽滅菌器操作步驟
1.首先將內層滅菌桶取出,再向外層鍋內加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。
2.放回滅菌桶,并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠,以免妨礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3.加蓋,并將蓋上的排氣軟管插入內層滅菌桶的排氣槽內。再以?xún)蓛蓪ΨQ(chēng)的方式同時(shí)旋緊相對的兩個(gè)螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。
4.用電爐或煤氣加熱,并同時(shí)打開(kāi)排氣閥,使水沸騰以排除鍋內的冷空氣。待冷空氣*排盡后,關(guān)上排氣閥,讓鍋內的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內壓力升到所需壓力時(shí),控制熱源,維持壓力至所需時(shí)間。本實(shí)驗用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分鐘滅菌。
5.滅菌所需時(shí)間到后,切斷電源或關(guān)閉煤氣,讓滅菌鍋內溫度自然下降,當壓力表的壓力降至0時(shí),打開(kāi)排氣閥,旋松螺栓,打開(kāi)蓋子,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí),打開(kāi)排氣閥,就會(huì )因鍋內壓力突然下降,使容器內的培養基由于內外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養基而發(fā)生污染。
6.將取出的滅菌培養基放入 37℃溫箱培養24小時(shí),經(jīng)檢查若無(wú)雜菌生長(cháng),即可待用。
高壓蒸汽滅菌器注意事項
注意:*排除鍋內空氣,使鍋內全部是水蒸氣,滅菌才能*。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法,但目的都是要排凈空氣,使鍋內均勻升溫,保證滅菌*。常用方法是:關(guān)閉放氣閥,通電后,待壓力上升到0.05MPa時(shí),打開(kāi)放氣閥,放出空氣,待壓力表指針歸零后,再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后,壓力表上升達到0.1MPa時(shí),開(kāi)始計時(shí),維持壓力0.1~0.15MPa 20分鐘。
到達保壓時(shí)間后,即可切斷電源,在壓力降到0.05MPa,可緩慢放出蒸氣,應注意不要使壓力降低太快,以致引起激烈的減壓沸騰,使容器中的液體四溢。當壓力降到零后,才能開(kāi)蓋,取出培養基,擺在平臺上,以待冷凝。不可久不放氣,引起培養基成分變化,以至培養基無(wú)法擺斜面 。一旦放置過(guò)久,由于鍋爐內有負壓,蓋子打不開(kāi),只要將放氣閥打開(kāi),大氣壓入,內外壓力平衡,蓋子便易打開(kāi)了。
對高壓滅菌后不變質(zhì)的物品,如無(wú)菌水、栽培介質(zhì)、接種用具,可以延長(cháng)滅菌時(shí)間或提高壓力。而培養基要嚴格遵守保壓時(shí)間,既要保壓*,又要防止培養基中的成分變質(zhì)或效力降低,不能隨意延長(cháng)時(shí)間。